一、什么情況下出現(xiàn)凝血?如何解決?
(1)標本中抗凝劑少,抗凝劑與標本不能達到最適比例,出現(xiàn)凝血。
解決辦法:注意取樣量,使標本中抗凝劑適量。
(2)PHA過多,簡稱植物血凝素,就是促進凝血的一種物質(zhì),當PHA過多時,容易導致凝血。
解決辦法:降低PHA含量。
二、染色體培養(yǎng)過程中最容易造成細胞團數(shù)量少、細胞瘦小、短粗、分裂相少、是怎樣造成的,如何解決?
1.樣本本身問題,陳舊血樣,或樣本本身含有淋巴細胞數(shù)量少
2.秋水仙素處理的時間過長,分裂的細胞多,染色體容易瘦小
3.營養(yǎng)物質(zhì)少—血清,造成細胞發(fā)育不良,瘦小,分裂像少
4.PHA含量少,使進入有絲分裂的細胞數(shù)量少,分裂像少
三、把1640實驗做的好的,差的,拍下來講一講區(qū)別,是否會影響實驗結(jié)果,及臨床出報告。
好的:低倍鏡下視野下細胞數(shù)量多,分裂像數(shù)目多;高倍鏡下,分裂像散在分布,能準確的配對,判讀結(jié)果
壞的:低倍鏡下視野下細胞數(shù)量少,分裂像數(shù)目少;高倍鏡下,分裂像成團分布,或者染色體瘦小,短粗,不能準確配對,判讀結(jié)果
四、培養(yǎng)基細胞溫度、濕度多少為最佳?
溫度在37±0.5度,PH=7.2---7.4,偏酸細胞發(fā)育不良,偏堿細胞出現(xiàn)萎縮
五、外周血是G顯帶、骨髓R顯帶,區(qū)別是什么?
G帶:即吉姆薩帶,處于分裂中期的細胞經(jīng)處理后,再經(jīng)吉姆薩染料染色后所呈現(xiàn)的區(qū)帶。是染色體上出現(xiàn)深淺交替的橫紋,一般應用于外周血的染色體培養(yǎng)
R帶是中期染色體不經(jīng)處理的情況下,經(jīng)吉姆薩染色后所呈現(xiàn)的區(qū)帶,所呈現(xiàn)的是G帶染色后的帶間不著色區(qū),故又稱反帶,一般應用于骨髓的染色體培養(yǎng)
六、PHA起什么作用、少了會出現(xiàn)什么問題?
PHA,簡稱植物血凝素,當PHA過多時,容易導致凝血,PHA含量過低,不能刺激細胞進入有絲分裂期
七、 取材瓶在臨床上如何應用?取樣后什么溫度保存多長時間內(nèi)效果最好?
一般應用于骨髓中淋巴細胞的染色體培養(yǎng),抽血骨髓后,先放于取材瓶中,一般2-8度保存,淋巴細胞本身是有壽命的,生存時間是2-3天,多以盡量縮短在取材瓶中的放置時間,盡快接種到染色體培養(yǎng)基中。
八、為什么取材里有的單位要多加血清?起到什么作用?
血清是一種營養(yǎng)物質(zhì),給淋巴細胞提供一定的營養(yǎng)
九、什么情況下1640做到微核、微核、與做到培養(yǎng)之間有什么區(qū)別?
微核也叫衛(wèi)星核,是真核類生物細胞中的一種異常結(jié)構(gòu),是染色體畸變在間期細胞中的一種表現(xiàn)形式。微核往往是各種理化因子,如輻射、化學藥劑對分裂細胞作用而產(chǎn)生的。
十、影響1640產(chǎn)品頗動的主要因素有哪些?胎牛血清、PHA、1640粉?
胎牛血清:主要為細胞提供營養(yǎng)
PHA:刺激淋巴細胞進入有絲分裂
1640粉:細胞生存的媒介環(huán)境
十一、 公司提供的秋水的濃度,要求終濃度為0.6-0.8mg/ml,如何換算加樣量?
一般加樣量為3-5滴(5ml注射器針頭);
十二、 用戶常問到做髓系或淋系,這兩種有什么區(qū)別,各對應哪種培養(yǎng)基;
髓系:指骨髓,培養(yǎng)骨髓中的淋巴細胞,對應骨髓染色體培養(yǎng)基
淋系:指淋巴細胞,培養(yǎng)外周血的淋巴細胞,對應外周血染色體培養(yǎng)基
十三、 培養(yǎng)基反復凍融幾次不影響效果?高溫30度以上,運輸4天,影響效果嗎?怎樣解決?
反復凍融幾次這個沒有做過這方面的對比試驗,但是凍融一次應該沒有問題。
溫度一般會影響PH值,溫度越高,PH值會降低
多放冰袋,維持溫度穩(wěn)定性,縮短外界暴露時間。